Centrífuga de baixa velocitat
Descripció
Paràmetres tècnics
A centrífuga de baixa velocitatSpins per crear força centrífuga que separa components de diferents densitats en una mostra. Durant la separació cel·lular, les cèl·lules, els fragments de cèl·lules i altres biomolècules es separen en diferents llocs per força centrífuga, segons la seva massa i la seva densitat. Concretament, quan el tub de mostra es gira a alta velocitat dins del rotor de la centrífuga, la força centrífuga dels diferents components de la barreja és proporcional a la seva massa i també es veu afectada per la velocitat i el radi de rotació. Es treuen cèl·lules o partícules més grans cap a la part inferior del tub de centrífuga, mentre que els components més petits romanen a la capa superior. Aquest principi de separació basat en la densitat i la massa fa que els centrífugs de baixa velocitat siguin una eina ideal per a la separació cel·lular.
Procediment de centrífuga de baixa velocitat en separació cel·lular
| ◇Preparació de la mostra: Primer, heu de preparar la mostra de la cel·la per separar -la. Normalment inclou cultius cel·lulars, mostres de sang o altres mostres biològiques que contenen cèl·lules. Assegureu -vos que la mostra s'ha pretractat correctament abans de la centrifugació, com la dilució, la digestió o la filtració. ◇ Seleccioneu el tub de centrífuga dreta: Seleccioneu el tub de centrífuga dreta segons el volum de la mostra i la força centrífuga necessària.Centrífuga de baixa velocitatS sol donar suport a una varietat de tubs de centrífuga, com ara 15ml, 50ml o 100ml. Assegureu -vos que el tub centrífuga sigui de bona qualitat i segellat per evitar fuites durant el procés centrífuga. ◇Mostres d’equilibri: Abans de col·locar mostres a la centrífuga, heu de garantir que les mostres de tots els tubs de centrífuga siguin de massa igual o similar. Això es pot fer pesant la massa de la mostra a cada tub de centrífuga. L’equilibri de la mostra és essencial per evitar que la centrífuga generi vibració i soroll durant el funcionament. |
|
|
|
◇ Estableix paràmetres centrífugues: Segons els requisits experimentals, configureu la velocitat i el temps centrífugals adequats. El rang de velocitat de centrífugs de baixa velocitat sol estar entre 300rpm i 10, 000 rpm, i el temps es pot ajustar segons el tipus de mostra i l'efecte de separació desitjat. ◇ Inicieu la centrífuga: Col·loqueu el tub de centrífuga equilibrat al rotor de la centrífuga i tanqueu la coberta de la centrífuga. A continuació, inicieu la centrífuga i la centrífuga segons els paràmetres establerts. Durant el procés de centrífuga, fixeu -vos en l’estat de funcionament de la centrífuga per assegurar -se que no hi ha vibració o soroll anormals. ◇ Recollir i processar les mostres després de la separació: Després de la centrifugació, tanqueu la centrífuga i espereu que s’aturi completament. El tub de centrífuga s’elimina amb cura i el sobrenedant i el precipitat de la cèl·lula es recullen en contenidors separats mitjançant una eina adequada, com ara una pipeta. Segons les necessitats de l'experiment, es pot netejar, cultivar o analitzar la precipitació cel·lular. |
Consideracions de centrífuga de baixa velocitat en la separació cel·lular
● Triar la velocitat i el temps centrífugals adequats: L’elecció de la velocitat i el temps és crucial per a l’efectivitat de la separació cel·lular. Una velocitat de rotació massa elevada pot provocar una ruptura o un dany cel·lular, mentre que el temps massa llarg pot provocar una agregació cel·lular o una precipitació incompleta. Per tant, la selecció de paràmetres centrífugs s'ha de considerar segons el tipus, la mida i la densitat de les cèl·lules.
● Assegureu -vos de l'equilibri de la mostra: El saldo de la mostra és la clau per evitar que la centrífuga generi vibració i soroll durant el funcionament. Quan es col·loquen mostres, cal assegurar -se que les mostres de tots els tubs de centrífuga siguin de massa igual o similar. Si hi ha una gran diferència en la qualitat de la mostra, es pot afegir una quantitat adequada de tampó o salina normal al tub de centrífuga més lleuger per aconseguir l'equilibri.
● Seleccioneu el tub de centrífuga dreta: La qualitat i la tensió del tub de centrífuga també tenen un impacte important en l'efectivitat de la separació cel·lular. Els tubs centrífugues d’alta qualitat tenen una bona resistència a la corrosió i a la corrosió, cosa que pot prevenir eficaçment les fuites i la contaminació de la mostra. Al mateix temps, també cal seleccionar l'especificació del tub centrífuga segons el volum de la mostra i la força centrífuga requerida.
● Fixeu -vos en el manteniment i el manteniment de la centrífuga: Netegeu regularment la cambra centrífuga i el rotor de la centrífuga per evitar la contaminació residual de mostres. Netegeu el temps després de l’ús per evitar la corrosió causada per residus líquids. Al mateix temps, també és necessari comprovar regularment el cable d’alimentació i el connector i altres components de la centrífuga per assegurar -se que estan intactes i evitar els perills de seguretat.
Aplicació de centrífuga de baixa velocitat en biotecnologia
● Tractament cel·lular en enginyeria genètica: En enginyeria genètica, les cèl·lules sovint han de ser cultivades, transfectades, analitzades i altres tractaments. Els centrífugs de baixa velocitat es poden utilitzar per a passos com la concentració i el rentat de les suspensions cel·lulars, així com la recollida de cèl·lules després de la transfecció. Per centrifugació, es poden eliminar les impureses i les cèl·lules no transfectades del medi de cultiu cel·lular i es pot millorar l'eficiència i la puresa de la transfecció gènica.
● Purificació i aïllament de proteïnes: En la investigació de proteïnes, cal purificar proteïnes específiques a partir de mostres biològiques complexes. Els centrífugs de baixa velocitat es poden utilitzar per a l'aclariment inicial de les solucions de proteïnes i l'eliminació de les impureses, com ara les deixalles cel·lulars, els àcids nucleics, etc. mitjançant tractament centrífuga, es pot obtenir una solució de proteïna relativament pura, que proporciona la base per a passos de purificació posteriors.
● Aïllament i purificació de partícules de virus: Les partícules de virus solen tenir una densitat i mida específiques i es poden separar i purificar mitjançant centrífugs de baixa velocitat. Per exemple, en la investigació de la virologia, les partícules virals es poden separar de cultius cel·lulars mitjançant centrifugació diferencial. Aquest mètode aprofita les diferències en les forces centrífugues a diferents velocitats per separar partícules virals d’altres components cel·lulars.
● Producció i control de qualitat dels fàrmacs biològics: En el procés de producció de fàrmacs biològics, els centrífugs de baixa velocitat s’utilitzen sovint per a l’aclariment del fluid de cultiu cel·lular, l’eliminació de les deixalles cel·lulars i la separació inicial dels productes farmacèutics. A més, en el control de qualitat dels fàrmacs, també es poden utilitzar centrífugues de baixa velocitat per detectar indicadors clau com la distribució de la mida i l’estabilitat de les partícules de fàrmacs.
Aplicació de centrífuga de baixa velocitat en separació de partícules de virus
◇ Separació primària: Els centrífugs de baixa velocitat s’utilitzen sovint per a la separació primària de partícules de virus. En el procés d’extracció de virus, es poden eliminar partícules grans com fragments de cèl·lules i impureses mitjançant centrifugació de baixa velocitat i es pot obtenir una suspensió de virus relativament pura. Aquest pas facilita els passos de purificació posteriors.
◇ Enriquiment del virus: En alguns casos, també es poden utilitzar centrífugs de baixa velocitat per a l’enriquiment de virus. Ajustant el temps i la velocitat de centrífuga, es poden dipositar les partícules del virus a la part inferior del tub de centrífuga, de manera que es pot obtenir la mostra de virus concentrat extreure el sobrenedant. Tanmateix, cal destacar que l’efecte d’enriquiment dels centrífugues de baixa velocitat és relativament limitat i, en ocasions en què es requereixen virus d’alta puresa, normalment es requereixen altres mètodes de purificació.

Combinat amb altres mètodes de purificació
● Mètode centrífuga diferencial: El mètode centrífuga diferencial és un mètode per separar partícules de diferents mides i densitats mitjançant diferents velocitats i temps centrífugues. La centrifugació diferencial s’utilitza sovint per eliminar encara més les impureses i concentrar el virus durant la purificació del virus. Després d’eliminar partícules grans com els orgànuls per centrifugació de baixa velocitat, les partícules del virus es precipiten per una centrifugació d’alta velocitat.
● Mètode de centrifugació de gradient de densitat: El mètode de centrifugació de gradient de densitat és l’ús de medis de diferents densitats per formar un gradient, de manera que les partícules de diferents densitats s’instal·len a diferents posicions del mètode de gradient. En la purificació de virus, la centrifugació de gradient de densitat s’utilitza sovint per separar partícules de virus d’altres impureses de densitat similar (com proteïnes, àcids nucleics, etc.). En preparar el gradient de densitat al tub de centrífuga amb antelació i, a continuació, afegint la suspensió del virus a la superfície del gradient per centrifugació, les partícules del virus s’instal·laran en una posició específica del gradient per formar una zona de sedimentació.
● Mètode de precipitació: El mètode de precipitació és precipitar les partícules del virus afegint reactius químics. Els agents de precipitació habituals inclouen sulfat d’amoni, polietilenglicol (PEG), etc. El mètode de precipitació es pot utilitzar per a la purificació posterior del virus. Ajustant la concentració i el valor de pH del precipitator, les partícules del virus es poden precipitar selectivament per eliminar les impureses.
● Mètode de filtració: El mètode de filtració és un mètode per separar les partícules de virus d’altres impureses mitjançant la columna de cromatografia de filtració en gel. La columna cromatogràfica del filtre de gel es separa segons la mida de les partícules i les molècules grans surten de la columna cromatogràfica primer i les molècules petites surten més tard. Seleccionant Gel i condicions cromatogràfiques adequades, les partícules de virus es poden separar efectivament de les altres impureses.
● Mètode electroforètic: El mètode electroforètic és l’ús d’acció de camp elèctric per fer partícules carregades en el mètode de migració del camp elèctric. En la purificació de virus, l’electroforesi s’utilitza sovint per separar partícules virals d’altres impureses carregades. Es pot aconseguir la separació i la purificació eficients de les partícules de virus seleccionant les condicions d’electroforesi adequades i els suports.
Etiquetes populars: Centrifuge de baixa velocitat, fabricants de centrífuga de baixa velocitat, proveïdors, fàbrica
Un parell de
Lab Mill Three Roll MillEnviar la consulta













